產(chǎn)品概述:
本試劑盒采用獨特的細胞裂解和血紅素/蛋白沉淀技術(shù),結(jié)合DNA制備膜選擇性地吸附DNA 的方法達到純化基因組DNA 的目的。200-250 μl的抗凝全血中獲得多至12 μg的基因組DNA。
一 、試劑盒組成、貯存、穩(wěn)定性
Cat.No. |
UE-MN-BL-GDNA-10 |
UE-MN-BL-GDNA-50 |
UE-MN-BL-GDNA-250 |
Kit size |
10 preps |
50 preps |
250 preps |
Miniprep column |
10 |
50 |
250 |
2 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
1.5 ml Microfuge tube |
10 |
50 |
250 |
Buffer AP1 |
6 ml |
30 ml |
150 ml |
Buffer AP2 |
2 ml |
6 ml |
30 ml |
Buffer W1A concentrate |
5 ml |
24 ml |
120 ml |
Buffer W2 concentrate |
5 ml |
24 ml |
2×72 ml |
Buffer TE |
3 ml |
11 ml |
60 ml |
Protocol manual |
1 |
1 |
1 |
Buffer AP1:細胞裂解液,室溫密閉貯存。
Buffer AP2:蛋白沉淀液,室溫密閉貯存。
Buffer W1A concentrate:洗滌液。使用前,按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇(可用100%乙醇或 95%乙醇)。混合均勻,室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate:去鹽液。使用前,按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇(可用100%乙醇或 95%乙醇)。混合均勻,室溫密閉貯存。
Buffer TE:5 mM Tris-HCI,0.1 mM EDTA,pH 8.5。室溫密閉貯存。
二、注意事項
1. 如果從鳥類、兩棲類或更低級的動物中提取基因組DNA,因其血液中紅細胞有核,血液用量勿超過10 μl,并加 PBS 溶液將血樣體積稀釋到250 μl后再按正常步驟操作。
2. 制備管可結(jié)合多至25 μg 的基因組 DNA。 若需更多的基因組DNA,可用0.5 ml 血來提取基因組DNA。將0.5 ml血樣分成兩管,每管250 μl, 按步驟1至4制備提取。將步驟4所得到的上清混合,加到同一個制備管中結(jié)合基因組DNA,最后用100-200 μl的 Buffer TE洗脫基因組DNA。
3. Buffer AP1和 Buffer W1A 含刺激性化合物,操作時要戴乳膠手套和眼鏡,避免沾染皮膚、眼睛和衣服,謹防吸入口鼻。若沾染皮膚、眼睛時,要立即用大量清水和生理鹽水沖洗,必要時尋求醫(yī)療咨詢。
4. 為了保持基因組DNA的性能的完整性以及PCR 擴增的特異性,純化的基因組DNA應用含有0.1 mM EDTA的低鹽濃度的Tris 緩沖液洗脫和貯存。