Double Helix? Cell Freezing Medium 海利克思?通用細(xì)胞凍存液

產(chǎn)品說明書

Double Helix? Cell Freezing Medium 海利克思?通用細(xì)胞凍存液中不含血清成分 ，配方化學(xué)成分明    確 ，不含動(dòng)物來源蛋白。通過含有DMSO 的復(fù)合型凍存保護(hù)劑 ，在細(xì)胞凍存過程中避免細(xì)胞內(nèi)部形成冰 晶 ，提高細(xì)胞復(fù)蘇活率 ，適合長期低溫保存細(xì)胞。

質(zhì)量屬性

產(chǎn)品用途

在處理凍存液時(shí)使用無菌技術(shù)。本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究。

安全信息

閱讀物料安全數(shù)據(jù)表（MSDS）并依據(jù)相關(guān)的安全操作規(guī)范 ，佩戴護(hù)目鏡 ，潔凈服 ，口罩和手套等。

細(xì)胞凍存步驟

1.準(zhǔn)備所需凍存的細(xì)胞 ，且細(xì)胞狀態(tài)較好；

2.使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀或其它計(jì)數(shù)儀器進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù) ，根據(jù)最終凍存密度計(jì)算出細(xì)胞凍存液所需的體 積；

3.通過 1000rpm  離心 5 分鐘收獲細(xì)胞 ，棄去上清 ，用細(xì)胞凍存液重懸；

4.根據(jù)規(guī)格立即將細(xì)胞懸液分裝到凍存管中；

5. 在自動(dòng)控制速率冷凍設(shè)備中實(shí)現(xiàn)程序性降溫后 ，將凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮或-80℃以下保存；若無法實(shí) 現(xiàn)程序性降溫 ，可以在-80℃冰箱冷凍保存 24 小時(shí)后 ，將凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移到液氮或-80℃以下保存。

細(xì)胞復(fù)蘇步驟

1. 將凍存細(xì)胞從液氮罐或者-80℃冰箱中取出 ，迅速在37℃水浴中快速解凍 ，過程約1~2 分鐘；

2. 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至 5mL 預(yù)熱的細(xì)胞培養(yǎng)基 ，吹打均勻；1000rpm 離心 5 分鐘 ，丟棄上清液；使用 5mL 細(xì)胞培養(yǎng)基重懸；

3.使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀或其它計(jì)數(shù)儀器進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù) ，根據(jù)需要的細(xì)胞密度吸取細(xì)胞懸液至125mL 搖 瓶 ，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)基 ，使復(fù)蘇細(xì)胞密度為 (3～5)×105cells/mL；

4.在 5～8% CO2 ，37℃的培養(yǎng)箱或搖床進(jìn)行培養(yǎng)；

5. 細(xì)胞復(fù)蘇后培養(yǎng) 2～5 天處于對數(shù)生長中期時(shí)傳代。在進(jìn)行其它實(shí)驗(yàn)之前 ，復(fù)蘇的細(xì)胞至少應(yīng)進(jìn)行三 次傳代。

建議凍存密度

注意事項(xiàng)

1.選擇凍存處于對數(shù)生長期 ，且活率＞95%的細(xì)胞 ，有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率；

2.不同細(xì)胞類型凍存效果可能存在差異 ，建議在使用本產(chǎn)品大規(guī)模凍存細(xì)胞前 ，先進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性凍存及復(fù) 蘇測試 ，確認(rèn)性能后再進(jìn)行正式凍存。例 ：常規(guī)細(xì)胞株 ，凍存前細(xì)胞活率＞95% ，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性凍存及 復(fù)蘇測試 ，復(fù)蘇后細(xì)胞活率＞90%為佳。

圖標(biāo)定義