產(chǎn)品概述：
產(chǎn)品貨號：M7428S, M7428M
產(chǎn)品規(guī)格：20 rxns, 100 rxns
儲存條件：RNase A保存于-20℃（可短期常溫保存或運(yùn)輸），其他試劑2~35℃保存，有效期見外包裝
產(chǎn)品組分
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組分 |
組分含量 |
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M7428S |
M7428M |
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A.磁珠懸液 |
0.3 mL |
1.5 mL |
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B.裂解液 |
12 mL |
60 mL |
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C. RNaseA |
60 μL |
300 μL |
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D.結(jié)合液 |
12 mL |
60 mL |
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E.洗滌液I |
24 mL |
120 mL |
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F.洗滌液II |
4.8 mL |
24 mL |
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G.洗脫液 |
2 mL |
10 mL |
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H.蛋白酶K |
0.3 mL |
1.5 mL |
產(chǎn)品介紹
本產(chǎn)品適用于從植物樣本中快速、高效地提取DNA。提取過程采用超順磁性微球，無需離心操作；使用預(yù)制的緩沖液，可直接進(jìn)行提取，且可根據(jù)加入的樣本量來調(diào)整反應(yīng)體系。本產(chǎn)品既可以手動進(jìn)行少量樣品的提取，也適合于用自動化工作站進(jìn)行高通量操作。提取的產(chǎn)物可用于酶切、PCR擴(kuò)增、檢測等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)步驟
一．首次使用前
1. 在洗滌液Ⅱ中加入指定量（見管身標(biāo)簽）的無水乙醇，并于“□”內(nèi)打上“√”，混勻后需保存于2~8℃或室溫。
2. 若裂解液有沉淀可將其置于55℃孵育5~10 min使沉淀完全溶解混勻。
二．自備試劑及耗材
1.無水乙醇
2.EP管（1.5mL離心管，3個(gè)/樣品）
3.單通道移液器：20 μL、200 μL、1000 μL
4.渦旋震蕩器、恒溫金屬浴（或水浴鍋）
5.磁性分離器：可選用UE磁性分離器（貨號：M7429）
三．實(shí)驗(yàn)操作
植物樣本研磨（以100 mg樣本量為例）
1. 取足量新鮮植物樣本或凍存樣本，加入液氮充分研磨。
2.裂解：向1.5mL離心管中加入50~100 mg研磨的植物樣本，依次加入600 μL裂解液、3 μL RNaseA溶液、15 μL蛋白酶K，調(diào)整合適的轉(zhuǎn)速漩渦振蕩1 min，充分混合后室溫靜置15 min。13000 rpm離心5min，轉(zhuǎn)移300 μL上清至新的1.5mL離心管中。
3.結(jié)合：向上述離心管中依次加入600 μL結(jié)合液、15 μL磁珠懸液 ，震蕩混勻30 s，室溫結(jié)合5 min，期間顛倒混勻兩次，然后將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下離心管。
注：此步驟磁性分離時(shí)間應(yīng)不少于2 min。
4.洗滌I：向1.5 mL離心管中加入600 μL洗滌液I，震蕩混勻30 s，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下離心管。再重復(fù)此操作1次。
5.洗滌II：將1.5 mL離心管從磁力架上取下，加入600 μL洗滌液II，渦旋震蕩30s，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下離心管。再重復(fù)此操作1次。
6.干燥：保持離心管于磁性分離器上，將其置于室溫中風(fēng)干至磁珠表面無明顯光澤（10 min），取下離心管。
注：干燥過程中若發(fā)現(xiàn)反應(yīng)管中有液體殘留時(shí)，可用小量程移液器吸棄液體。
7.洗脫：加入50~100 μL 65℃預(yù)熱的洗脫液，震蕩混勻30 s，于65℃加熱5 min后，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，轉(zhuǎn)移上清液至新的1.5 mL離心管中，此即為純化得到的植物DNA，可保存于-20℃。
注意事項(xiàng)
1.操作之前，請務(wù)必認(rèn)真閱讀本產(chǎn)品手冊。
2.提取效果與樣本質(zhì)量有關(guān)，應(yīng)避免對樣本進(jìn)行反復(fù)凍融。
3.應(yīng)避免對磁珠進(jìn)行冷凍、離心等操作。
4.磁珠取用前應(yīng)充分重懸均勻。
5.磁珠干燥前，應(yīng)用移液器吸盡洗滌液。
6.應(yīng)避免磁珠過度干燥，否則會嚴(yán)重降低核酸洗脫效率。
7.建議使用質(zhì)量較好的離心管和移液槍吸頭，避免因粘附磁珠而造成損失。
8.若試劑出現(xiàn)沉淀，可于55℃溶解5 min。
說明書：
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