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您的位置:首頁>產品中心>核酸純化和抽提>磁珠法核酸提取試劑盒磁珠法核酸提取試劑盒
  • 唾液基因組提取試劑盒

    產品貨號: M7425S/M7425M

    產品規格: 20 rxns/100 rxns

    目錄價(元):544/2084

    大包裝詢價


產品概述:

產品貨號:M7425S, M7425M

產品規格:20 rxns, 100 rxns

儲存條件:2~8℃保存,可在常溫下短時間儲存,有效期見外包裝

應用范圍:各種唾液、拭子保存液等液體樣品的基因組提取


產品組分

組分

組分含量

M7425S

M7425M

A.磁珠懸液

1 mL

5 mL

B.裂解液

4 mL

20 mL

C.洗滌液I

24 mL(首次使用前請加入24 mL無水乙醇)

120 mL(首次使用前請加入120 mL無水乙醇)

D.洗滌液II

6 mL(首次使用前請加入14 mL無水乙醇)

30 mL(首次使用前請加入70 mL無水乙醇)

E.洗脫液

4 mL

20 mL

F.蛋白酶K

4 mg(首次使用前請加入0.4 mL溶液A)

20 mg(首次使用前請加入2 mL溶液A)

G.溶液A

0.4 mL

2 mL


產品介紹

本產品使用超順磁性微球可以特異性的從唾液內吸附DNA,通過洗滌去除DNA以外的蛋白質等雜質。洗脫液解離吸附在磁珠上的DNA,分離純化得到高質量核酸。


適用儀器

本試劑盒適用于TIANGEN TGuide S32, TIANLONG NP968-C,Thermo KingFisher Flex24等大體積自動化核酸提取儀,也適用于手動提取。


實驗步驟

一. 手動操作流程

1. 客戶自備物品

(1)異丙醇(分析純)

(2)無水乙醇(分析純)

(3)1.5 mL離心管、2 mL離心管:2個/樣品


(4)單通道移液器:200 μL、1000 μL

(5)漩渦振蕩器

(6)垂直混合儀

(7)恒溫金屬浴或水浴鍋

(8)磁性分離器

2.操作步驟(以400 μL樣本量為例)

(1)唾液樣本裂解

a.向1.5 mL離心管中加入400 μL唾液樣本(若樣本體積不足400 μL,請加入唾液保存液補齊至400 μL)、20μL蛋白酶K溶液、以及200 μL裂解液,渦旋混勻。

注意:裂解液低溫情況下可能出現沉淀,可于37℃加熱2 min融化。

b.將離心管與55℃溫浴10 min,期間每隔5 min搖晃混均一次,完畢后低速瞬離使管蓋以及管壁上液體集中到官底,待用。

(2)結合:向上述離心管中加入350 μL異丙醇,再加入50 μL磁珠懸液,渦旋震蕩3 min混勻后靜置2 min。

(3)磁性分離:將離心管置于磁力架上靜置20 s至磁珠吸附完全;如果離心管內蓋有磁珠,可保持EP管在磁力架上,整體上下顛倒2-3次至磁珠完全吸附。保持EP管固定于磁力架上,用移液槍吸棄上清液,期間避免接觸磁珠。

(4)洗滌1:向1.5mL離心管中加入800 μL洗滌液I,將1.5mL離心管從磁力架上取下,用移液槍吹散磁珠,渦旋震蕩2 min,磁性分離(參照步驟3)操作),再重復此操作1次。

(5)洗滌2:使用800 μL洗滌液II,(參照步驟(4)操作)。

(6)干燥:保持離心管于磁性分離器上,于是室溫下開蓋靜置10 min后,取下離心管。

注意:干燥過程中若發現反應管中有液體殘留時,可用小量程移液器吸棄液體。

7)洗脫:加入100 μL洗脫液 ,渦旋震蕩1 min或用移液器緩慢 吹打磁珠50次,使磁珠充分懸浮,于65℃加熱10 min后,將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清,轉移上清液至新的1.5 mL離心管中,此即為純化得到的唾液DNA,可保存于-20℃。

二、自動化操作流程

可以適配市面上大部分品牌核酸提取儀,詳細參數請聯系我司技術支持或設備廠商技術支持。


注意事項

1.操作之前,請務必認真閱讀本產品手冊。

2.唾液樣品的質量對產物DNA的純化量有較大影響,應避免反復凍融唾液樣品。

3.蛋白酶K干粉溶解后,可分裝儲存于-20℃,但應避免反復凍融。

4.應避免對磁珠進行冷凍、離心等操作。

5.磁珠取用前應充分重懸均勻。

6.磁珠干燥前,應使用移液器吸盡洗滌液。

7.應避免磁珠過度干燥,否則會嚴重降低核酸洗脫效率。

8.建議使用質量較好的離心管和移液器吸頭,避免因粘附磁珠而造成損失。

9.在96孔板中進行磁性分離操作時,磁珠吸附時間可適當延長。

10.使用前請檢查各組分是否存在析出情況,如有析出,請將試劑瓶置于60℃水浴加熱溶解后使用。


說明書:


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