產品概述：
產品貨號：M7419S, M7419M
產品規格：10 rxns, 100 rxns
儲存條件：2~8℃保存，有效期見外包裝
應用范圍：適用于新鮮或冷凍的抗凝處理的人全血、組織、脫落細胞、拭子、血漿、血清、唾液、FFPE樣本
產品組分
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組分 |
組分含量 |
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M7419S |
M7419M |
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A.磁珠懸液 |
0.2 mL |
2 mL |
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B.裂解液 |
2.5 mL |
25 mL |
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C.洗滌液Ⅰ |
6 mL |
60 mL |
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D.洗脫液 |
3 mL |
30 mL |
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E.蛋白酶K |
2 mg |
20 mg |
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F.溶液A |
0.1 mL |
1 mL |
產品介紹
本產品使用超順磁性微球可以特異性的吸附核酸，通過洗滌去除核酸以外的蛋白質等雜質。洗脫液解離吸附在磁珠上的核酸，分離純化得到高質量核酸。
適用儀器
本試劑盒適用于BIO-DL 32,TIANGEN TGuide S32, TIANLONG NP968-C, Rosetta 96等自動化核酸提取儀，也適用于手動提取。
實驗步驟
一．首次使用前：
1. 在洗滌液I中緩慢加入指定量（見瓶身標簽）的異丙醇（分析純，需客戶自備），并于“□”內打上“√”，混勻后2~8℃保存。
2. 在蛋白酶K干粉中加入指定量（見管身標簽）的溶液 A，并于“□”內打上“√”，混勻后保存于 2~8℃，或分裝后保存于-20℃。
二．手動操作流程
1.客戶自備物品
（1）異丙醇（分析純）
（2）80%乙醇
（3）1.5 mL離心管：2個/樣品
（4）單通道移液器：20 μL、200 μL、1000 μL
（5）漩渦振蕩器
（6）垂直混合儀
（7）恒溫金屬浴或水浴鍋(55℃)
（8）磁性分離器
2.操作步驟
（1）裂解：取一個新的1.5 mL離心管，加入200μL的抗凝血液樣品（不足200μL時可用PBS或洗脫液補足），再分別加入10μL的蛋白酶K（檢查是否已加入溶液A）和230μL的裂解液，以渦旋振蕩器最大轉速漩渦震蕩10 s后，置于55℃條件下反應5 min。
（2）結合：加入320μL的異丙醇和20μL的磁珠懸液，以渦旋振蕩器最大轉速漩渦震蕩10 min（或漩渦震蕩10 s后置于垂直混合儀上反應10 min）。然后將離心管置于磁性分離器上放置2 min，用移液器移去上清液并取下離心管。
注意：此步驟的磁性分離時間應不少于2 min。
（3）洗滌
a.加入600μL洗滌液I（檢查是否已加入異丙醇），以渦旋振蕩器最大轉速漩渦震蕩至少1 min，使磁珠充分重懸，再將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，移去上清液并取下離心管。重復該步驟一次。
b.加入600μL 80%乙醇，以渦旋振蕩器最大轉速漩渦震蕩至少1 min，使磁珠充分重懸，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，移去上清液并取下離心管。重復該步驟一次。
注意：最后一步洗滌應盡量除盡洗滌液。
（4）干燥：保持離心管于磁性分離器上，于室溫下靜置10 min后，即磁珠表面無明顯光澤，取下離心管。
注意：干燥過程中若發現反應管中有液體殘留時，可用小量程移液器吸棄液體。
（5）洗脫：加入100~200μL洗脫液，渦旋震蕩，或用移液器緩慢吹打磁珠，使磁珠充分重懸。然后于55℃條件下加熱5 min，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，轉移上清液至新的1.5mL離心管中，此即為純化得到的基因組DNA，可保存于-20℃。
三．自動化操作流程
可以適配市面上大部分品牌核酸提取儀，詳細參數請聯系我司技術支持或設備廠商技術支持。
注意事項
1.操作之前，請務必認真閱讀本產品手冊。
2.血液樣品的質量對產物DNA的純化量有較大影響，應避免反復凍融血液樣品。
3.蛋白酶K干粉溶解后，可分裝儲存于-20℃，但應避免反復凍融。
4.應避免對磁珠進行冷凍、離心等操作。
5.磁珠取用前應充分重懸均勻。
6.磁珠干燥前，應使用移液器吸盡洗滌液。
7.應避免磁珠過度干燥，否則會嚴重降低核酸洗脫效率。
8.建議使用質量較好的離心管和移液器吸頭，避免因粘附磁珠而造成損失。
9.在96孔板中進行磁性分離操作時，磁珠吸附時間可適當延長。
10. 使用前請檢查各組分是否存在析出情況，如有析出，請將試劑瓶置于60℃水浴加熱溶解后使用。
說明書：
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