產品概述：
產品貨號：M7418S, M7418M
產品規格：20 rxns, 100 rxns
儲存條件：2~8℃保存，有效期見外包裝
產品組分
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組分 |
組分含量 |
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M7418S |
M7418M |
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A.磁珠懸液（UElandy Beads） |
0.4 mL |
2 mL |
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B.裂解液（Buffer LB） |
4.6 mL |
23 mL |
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C.洗滌液I（Washing Buffer I） |
12 mL |
60 mL |
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D.洗脫液（Buffer EB） |
2 mL |
10 mL |
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E.蛋白酶K（Proteinase K） |
0.4 mL |
2 mL |
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F.組織消化液（Buffer TD） |
4 mL |
20 mL |
產品介紹
本品適用于從動物組織中快速、高效地提取DNA。提取過程采用超順磁性微球特異性的吸附DNA，通過洗滌去除DNA以外的蛋白質等雜質，無需離心操作。本產品既可以手動進行少量樣品的提取，也適合于用自動化工作站進行高通量操作。提取的產物可用于酶切、PCR擴增、檢測等后續實驗。
適用儀器
本試劑盒適用于Thermo KingFisher Flex24等大體積自動化核酸提取儀，也適用于手動提取。
實驗步驟
一．自備試劑及耗材
1.80%乙醇
2.異丙醇（分析純）
3.RNase A (100 mg/mL，選配)
4.1.5 mL離心管：2個/樣品
5.單通道移液器：20 μL、200 μL、1000 μL
6.渦漩振蕩器
7.恒溫金屬浴或水浴鍋
8.磁性分離器：可選用UE磁性分離器（貨號：M7429）
二．首次使用前
在洗滌液I（Washing Buffer I）中緩慢加入指定量（見瓶身標簽）的異丙醇（分析純，需客戶自備），并于“□”內打上“√”，混勻后室溫保存。
三．樣本預處理
取動物組織5-20 mg（肝臟、脾、肺、腎臟＜10 mg），盡量處理成小塊，加入200 μL組織消化液（Buffer TD）和20 μL蛋白酶K（Proteinase K），振蕩混勻，60℃消化30 min或至樣品消化完全，期間振蕩混勻數次。
注：樣本消化完成后，如果有組織碎片，建議12,000 rpm離心1 min去除殘留雜質。
四．手動提取流程
1.取上述處理好的樣本200 μL轉移至1.5 mL離心管中。加入230 μL裂解液（Buffer LB），振蕩混勻，56℃孵育5 min。
2.加入320 μL異丙醇，振蕩混勻，加入20 μL磁珠懸液（UElandy Beads），振蕩混勻后置于垂直混懸儀上孵育10 min，然后將離心管置于磁性分離器上放置2 min，用移液器移去上清液并取下離心管。
3.加入600 μL洗滌液I（Washing Buffer I）（檢查是否已加入異丙醇），振蕩混勻1 min，使磁珠充分重懸，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，移去上清液并取下離心管。
注：如果需要去除RNA，可重復步驟3并加入2 μL RNase A，渦旋混勻，室溫放置10 min。
4.加入600 μL 80%乙醇，振蕩混勻1 min，使磁珠充分重懸，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，移去上清液并取下離心管。
5.保持離心管于磁性分離器上，室溫靜置約10 min，即磁珠表面無明顯光澤，取下離心管。
注：干燥過程中若發現反應管中有液體殘留時，可用小量程移液器吸棄液體。
6.加入50~100 μL洗脫液（Buffer EB），振蕩混勻，56℃孵育5 min，將離心管置于磁性分離器上直至溶液澄清，轉移上清液至新的離心管中，并于適當條件保存。
五．自動化操作流程
可以適配市面上大部分品牌核酸提取儀，詳細參數請聯系我司技術支持或設備廠商技術支持。
注意事項
1.操作之前，請務必認真閱讀本產品手冊。
2.提取效果與樣本質量有關，應避免對樣本進行反復凍融。
3.應避免對磁珠進行冷凍、離心等操作。
4.磁珠取用前應充分重懸均勻。
5.磁珠干燥前，應用移液器吸盡洗滌液。
6.應避免磁珠過度干燥，否則會嚴重降低核酸洗脫效率。
7.建議使用質量較好的離心管和移液槍吸頭，避免因粘附磁珠而造成損失。
8.若試劑出現沉淀，可于55℃孵育5min。
9.預裝板使用前需低速離心，確保溶液聚集在孔底。
10.提取結束后吸取洗脫液時如發現板內壁上有殘留洗脫液，也需一起吸取。
說明書：
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