產(chǎn)品參數(shù)

外觀：可溶于水的淺黃色固體

Ex/Em：328/533 nm

儲(chǔ)存條件

-20℃干燥避光保存，有效期見外包裝。

產(chǎn)品介紹

活體成像技術(shù)（optical in vivo imaging）目前主要采用生物發(fā)光（bioluminescence）與熒光（fluorescence）兩種技術(shù)，生物發(fā)光法是基于螢光素酶能催化底物化學(xué)發(fā)光的原理，將體外能穩(wěn)定表達(dá)螢光素酶的細(xì)胞株植入動(dòng)物體內(nèi)，與后期注射入體內(nèi)的底物發(fā)生反應(yīng)，利用光學(xué)系統(tǒng)檢測光強(qiáng)度，間接反映出細(xì)胞數(shù)量的變化或細(xì)胞的定位。這項(xiàng)技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域，最常用的有腫瘤或疾病動(dòng)物模型的建立，并可用于病毒學(xué)研究、siRNA研究、干細(xì)胞研究、蛋白質(zhì)相互作用研究等。

D-Luciferin是螢光素酶（Luciferase）的常用底物，普遍用于整個(gè)生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。在ATP和螢光素酶的作用下，螢光素能夠被氧化，并且在560 nm檢測到其化學(xué)發(fā)光。Luciferin由luc基因編碼，該基因作為報(bào)告基因在多種細(xì)胞中存在。由于化學(xué)發(fā)光的低背景性，luc基因在很低的表達(dá)水平下就可以被監(jiān)測到。此外，螢光素/螢光素酶被用來測量10^-15摩爾量的ATP。相比于基礎(chǔ)版D-螢光素鉀鹽（D1009），D-螢光素鉀鹽（增強(qiáng)型）在相同濃度下，底物與螢光素酶反應(yīng)后發(fā)光更強(qiáng)且更持久。

使用方法

1. 體外發(fā)光檢測

（1）用314 μL蒸餾水溶解10 mg D-螢光素鉀鹽，配制成100 mM的儲(chǔ)存液（200×）。混勻后立即使用或分裝后-20℃凍存。

（2）用細(xì)胞培養(yǎng)基1:200稀釋儲(chǔ)存液，配置工作液（終濃度150 μg/mL），即1× D-螢光素鉀鹽。

（3）去除培養(yǎng)細(xì)胞的培養(yǎng)基。

（4）向細(xì)胞內(nèi)添加適量1×螢光素工作液，然后進(jìn)行圖像分析（或者細(xì)胞放在37℃短時(shí)間孵育后檢測可增強(qiáng)信號(hào)）。

2. 活體成像分析

（1）用無菌的1× PBS配制D-螢光素鉀鹽工作液（15 mg/mL），即向10 mg D-螢光素鉀鹽中，加入667 μL 1×PBS，0.2 μm濾膜過濾除菌。使用時(shí)，需保持冰冷且避光。

（2）參照下表，根據(jù)不同的注射方式，注射不同的體積。

（3）注射入體內(nèi)5-10 min后，進(jìn)行成像分析。

注意事項(xiàng)