產品信息

儲存條件

4℃避光可穩定保存2年，具體批次有效期見外包裝

應用范圍

細胞骨架染色

產品介紹

鬼筆環肽是從致命的傘形毒蕈蘑菇中分離出來的一種毒素，可特異性結合于F-肌動蛋白的雙環肽。因此用熒光染料標記的鬼筆環肽可以非常方便的研究F-肌動蛋白的分布。鬼筆環肽內部，在半胱氨酸和色氨酸之間含有不常見的硫醚橋形成內環結構。在pH升高時，該硫醚被裂解，鬼筆環肽失去對肌動蛋白的親和力。

YF^®染料是我司開發的一系列新一代熒光染料，與其他熒光染料相比，在亮度，光穩定性和水溶性方面具有綜合優勢。YF^®熒光染料標記的鬼筆環肽可在納摩爾水平染色F-肌動蛋白。在各種植物細胞或動物細胞中，標記的鬼筆環肽對大、小細絲具有相似的親和力，平均每個肌動蛋白亞基結合一個鬼筆環肽分子。不同于抗體，鬼筆環肽與肌動蛋白的結合親和力在不同物種間沒有顯著變化。非特異性染色可以忽略不計，染色和未染色區域之間的對比度非常大。鬼筆環肽將單體/聚合物的平衡轉向聚合狀態，將聚合臨界濃度降低至30倍。鬼筆毒肽類（Phallotoxins）可通過抑制細胞松弛素的解聚，碘化鉀和升高的溫度，穩定F-肌動蛋白。因為鬼筆環肽綴合物很小，大約直徑12-15 ?，分子量< 2000 Daltons，多種肌動蛋白結合蛋白，包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌鈣蛋白依然可以和鬼筆環肽標記的肌動蛋白結合。更重要的是，鬼筆環肽標記的肌動蛋白絲保持功能，標記甘油肌纖維仍然收縮，標記的肌動蛋白絲仍然可以繼續移動。而且熒光標記的鬼筆環肽也可用于對細胞中F-肌動蛋白進行定量研究。

注意事項

1. 本染色液的濃度經過優化的，可以滿足多種常用細胞（如Hela（人宮頸癌細胞），vero（非洲綠猴腎細胞），ST (豬睪丸細胞)，C2C12（小鼠成肌細胞））的染色需要。如需調整使用濃度，請選擇本司YF^®染料/羅丹明標記鬼筆環肽粉末，自行配置合適的工作液濃度。

2. 避免使用含有甲醇的固定劑，這些會破壞肌動蛋白的結構而影響鬼筆環肽染色效果。

3. 熒光鬼筆環肽的染色效果與具體的細胞類型、固定/樣本制備條件和/或細胞/組織對探針的通透性密切相關。

4. 用含1% BSA的PBS預孵育固定細胞20-30 min可以改善染色效果。

5. 熒光標記的鬼筆環肽不具有細胞透性，因此沒有被廣泛用于活細胞標記。有報道稱活細胞可能通過胞飲或未知機制進行標記。一般來說，染色活細胞時需要更多的染料。熒光標記的鬼筆環肽也可被注入到細胞中用于監測肌動蛋白分布和細胞運動。對于本染色液，室溫孵育1h無法對活細胞染色。