產品概述:
產品貨號:P6223S,P6223M,P6223L
產品規格:25 μL,2×250 μL,10×250 μL
儲存條件:-20℃保存,有效期見外包裝
產品介紹
彩色預染蛋白Marker(8-250 kDa,三色)是一種包含三種顏色預染型蛋白的混合物。產品由11種不同分子量大小的高純度重組蛋白預混制備而成,涵蓋8-250 kDa的分子量范圍(8,17,25,33,43,55,72,100,130,180,250 kDa),其中8 kDa是綠色條帶,72 kDa是橙色條帶,其余9種蛋白為藍色條帶(見圖一)。本產品作為Western Blot或SDS-PAGE的蛋白分子量標準品,用于指示SDS-PAGE的電泳蛋白分離情況,亦用于評估Western Blot的轉膜效果。本產品在不同膠濃度以及不同的電泳緩沖液中遷移情況見圖二。產品已預混loading buffer,不需要加熱、稀釋或添加還原劑,即可直接點樣至蛋白凝膠孔內。我司同樣提供其他各種類型的彩色預染蛋白Marker供客戶自由選擇,詳見附表一。
圖一.本產品在12.5%濃度下Tris-Glycine電泳和轉印效果 圖二.本產品在不同膠濃度以及在同的電泳緩沖液中遷移情況
產品組成
緩沖液成分:62.5 mM Tris-H3PO4 (pH 7.5),2 mM EDTA,2% (W/V) SDS,33% (W/V) Glycerol,10 mM DTT。
使用方法
1. 從儲存冰箱中取出產品,置于室溫下進行解凍并輕柔混勻。無需加熱煮沸。
2. 直接吸取適宜體積的產品點樣至蛋白凝膠的相應孔內。推薦點樣量如下:
0.75-1.0 mm厚度:8 μL(15孔),10 μL(10孔);
1.5 mm厚度:10 μL(15孔),12 μL(10孔);
注:可以根據實驗情況進行適當調整點樣量。
3.使用完畢后,擰緊管蓋,放回冰箱進行保存。短期使用,可以在4℃冰箱保存2個月。長期保存置于-20℃冰箱。
注意事項
1. 產品請勿加熱煮沸。
2.本產品不含蛋白質his標簽。
3.本產品含有SDS,不適合用于非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳。
4. 在不同的凝膠緩沖體系中,預染蛋白質的遷移率會有所差別。
5. 在低濃度凝膠中,低分子量條帶會與溴酚藍染料指示條帶遷移速度接近而無法分離。可以先在該緩沖體系中用非預染蛋白分子量標準進行標定,可以大致確定蛋白質的分子量。
6. 一般電泳運行至溴酚藍指示條帶基本上到達凝膠底部或預染分子量標準分離展開時即可結束電泳。
7.由于銀染的靈敏度比考馬斯亮藍染色高10倍以上,使用本產品用于銀染試驗時適當減少產品的使用量。
8.該產品適用的Western Blot印跡膜材質包括聚偏二氟乙烯(PVDF)、尼龍(Nylon)和硝酸纖維素(NC)。
9.當轉印分子量大于100 kDa的蛋白時,適當延長轉印時間或提高電流(恒流電轉)/電壓(恒壓電轉),可以提高大分子量條帶的轉印效果。若仍不能有較好的轉印效果,可以適當減少電轉緩沖液的甲醇使用量并加入不高于0.02-0.04%的SDS。
附表一. 彩色預染蛋白Marker產品選擇指南
產品貨號 |
產品名稱 |
蛋白分子量分布(kDa) |
條帶數量 |
條帶顏色 |
類型 |
P6220 |
彩色預制蛋白Marker(25-400 kDa,四色) |
25 綠/45/72 橙/100/130/160/200/250/300/400 紅 |
10 |
綠/橙/藍/紅 |
高分子量 |
P6221 |
彩色預染蛋白Marker(25-300 kDa,三色) |
25 綠/45/72 橙/100/130/160/200/250/300 |
9 |
綠/橙/藍 |
高分子量 |
P8028 |
彩色預染蛋白Marker(10-250kDa,雙色) |
10/15/20/25 紅/35/40/50/70 紅/100/150/250 |
11 |
藍/紅 |
寬范圍 |
P6222 |
彩色預染蛋白Marker(10-250 kDa,三色) |
10/15/20/25 綠/35/40/50/70 橙/100/150/250 |
11 |
綠/橙/藍 |
寬范圍 |
P6223 |
彩色預染蛋白Marker(8-250 kDa,三色) |
8 綠/17/25/33/43/55/72 橙/100/130/180/250 |
11 |
綠/橙/藍 |
寬范圍 |
P6110 |
彩色預染蛋白Marker(10-180 kDa,三色) |
10 綠/17/25/33/43/55/70 橙/95/130/180 |
10 |
綠/橙/藍 |
寬范圍 |
P6224 |
彩色預染蛋白Marker(2.7-40 kDa,三色) |
2.7/4.2/6.5/10 綠/15/20/25/30/40 橙 |
9 |
綠/橙/藍 |
小分子量 |