產品概述:
產品介紹
RIPA裂解液(強,無抑制劑)可用于裂解細胞/組織,有效提取細胞質、細胞膜及細胞核蛋白,獲得的蛋白樣品可用于常規的蛋白分析,如Western Blot、IP等。本產品的主要成分為100 mM Tris-HCL(pH 8.0)、150 mM NaCl、1% Triton X-100、1% deoxycholic acid、0.1% SDS等。
UElandy提供的另外一款Western及IP細胞裂解液(W6001),其有效裂解成分為1% NP-40。相較于RIPA裂解液(強,無抑制劑),其裂解能力相對較弱,但能夠滿足一般用戶需求。遇到某些難溶解蛋白的Western,若發現Western及IP細胞裂解液效果不是非常理想,可以嘗試使用裂解強度更高的RIPA裂解液(強,無抑制劑)(R6166)。
以貼壁細胞(6孔板)舉例,每孔200 μL RIPA裂解液,100 mL試劑大概可以用于500個孔。
注意事項
1. RIPA裂解液(強,無抑制劑)含有較高濃度的去垢劑,因此與Bradford法測定蛋白濃度不兼容,如需測定蛋白濃度可選本公司生產的BCA蛋白定量檢測試劑盒(B6167)。
2. RIPA裂解液(強,無抑制劑)不含有蛋白酶或其他酶的抑制劑,使用前請根據實驗需求加入酶抑制劑,以防蛋白降解。
3. 裂解過程需在冰上進行。
4. 以Hela細胞為例,1 × 106 cells需要200 μL預冷的RIPA裂解液,該裂解液的量相對較充足,在有限細胞的情況下,如需提高蛋白濃度,可適當減少裂解液的量。
5. 裂解產物中如若出現的一小團透明膠狀物,屬于正常現象,是含有基因組DNA的復合物。