產品概述：
本試劑盒采用改進的SDS 堿裂解法，結合DNA制備膜選擇性地吸附DNA的方法達到快速純化質粒DNA的目的。適合于從120-300 ml 細菌培養物中提取多至500 μg高純的質粒DNA，用于測序、體外轉錄與翻譯、限制性內切酶消化、細菌轉化等分子生物學實驗。
一、試劑盒組成、貯存、穩定性
RNase A ：50 mg/ml, 室溫貯存6個月；長期貯存于-20℃。
Buffer S1：細菌懸浮液，加入RNase A后，混合均勻，4℃貯存。
Buffer S2：細菌裂解液（含SDS/NaOH），室溫密閉貯存。
Buffer S3K：中和液，室溫密閉貯存。
Buffer B：DNA結合溶液，室溫密閉貯存。
Buffer W1：洗滌液，室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate：去鹽液。使用前，按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇（用100%乙醇或95%乙醇），混合均勻，室溫密閉貯存。
Eluent：2.5 mM Tris-HCI，pH 8.5，室溫密閉貯存。
常見問題解答：
◆同樣體積的新鮮菌液，為什么有些提取的質粒濃度高，而有些質粒的濃度低？這些情況應該如何處理？
質粒提取高低的一個重要決定性因素是質粒載體的拷貝數，即質粒在一個大腸桿菌中的數目。對于低拷貝數的質粒，需要適當增加菌液的收集量，詳情請參閱說明書。
以下是幾種常見載體的拷貝數：
◆使用UE質粒大量制備試劑盒時，在DNA結合/洗滌步驟中能否使用離心法？
可以，使用與離心機配套的離心管可以進行離心。
◆我提取的質粒為什么會有基因組條帶？
菌體在裂解和中和過程中如果操作過于劇烈就容易引起基因組污染。加入Buffer S2后要輕柔混勻，加入Buffer S3后混合均勻。如果發現裂解物在操作過程中過于黏稠，需要適當降低菌體的用量。
◆我提取的質粒在電泳圖片上看，有一條緊挨著主帶的小條帶請問這是什么原因？如何判定它是否是雜帶？
那條帶很有可能就是變性條帶。如果在加入Buffer S2后沒有及時混勻菌體，會導致菌體局部堿性過強，破壞質粒的結構，在加入Buffer S3后質粒無法完全復性，就產生了這樣的變性條帶。
檢測的方式是通過酶切檢測，如果這條帶在酶切后依然存在，則是變性條帶，如果酶切后消失，則可能是質粒的不同狀態。
◆我提取的質粒有明顯的RNA污染，請問是什么原因？
可能有以下兩種可能：
1、RNase A活力下降。Buffer S1在加入RNase A后要保存在4℃冰箱。如果室溫放置，RNase A活力會下降，導致RNA污染。
2、菌體過量。如果使用的菌體量過多，也可能導致RNA污染。適當減少菌體的用量。
◆質粒得率很低，請問是什么原因？
質粒低的可能因素很多，以下是幾種可能原因：
1、菌體過量，導致菌體不能完全裂解和中和，最終導致質粒得率低。
2、Buffer W2中未按瓶子上得標注體積加入乙醇。
3、菌體老化，影響提取的效果。建議對菌液進行劃板培養，篩選新鮮克隆。◆請問Eluent Buffer的配方是什么？對于DNA測序有沒有影響？
Eluent Buffer 的配方是2.5mM Tris-HCl,pH8.0。質粒在這樣的溶液中能夠穩定保存，而且測序不受影響。
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