產(chǎn)品概述:
儲(chǔ)存條件
Buffer VL: 細(xì)胞和病毒裂解液,室溫密閉貯存。
Buffer G-B: 蛋白沉淀液,室溫密閉貯存。
Buffer DV-A: Buffer DV的制備液(請(qǐng)參照實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備BufferDV配制),室溫密閉貯存。
Buffer DV: 相分離液,室溫密閉貯存。
Buffer BV: DNA結(jié)合液,室溫密閉貯存。
Buffer W1: 洗滌液,室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate: 去鹽液。使用前,按試劑瓶上指定的體積加入無(wú)水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均勻,室溫密閉貯存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5, 室溫密閉貯存。

流程圖

常見(jiàn)問(wèn)題解答:
◆得率低或者得不到DNA
血液中白細(xì)胞的含量低
樣品與VL沒(méi)有充分的混勻
下相液體被上相液體污染減少了DNA與制備膜的結(jié)合
DNA過(guò)早的從膜上脫落。Buffer W2中沒(méi)有加無(wú)水乙醇或者用低濃度的乙醇代替了無(wú)水乙醇。
DNA沒(méi)有有效的被洗脫。可先將洗脫液于65℃預(yù)熱。
◆低 A260/280
樣品與VL沒(méi)有充分的混勻
樣品與DV沒(méi)有充分的混勻
樣品中白細(xì)胞的數(shù)量過(guò)多
血的用量過(guò)多
◆基因組降解
根據(jù)降解的完整性,在瓊脂糖凝膠電泳中基因組DNA要么呈現(xiàn)一條糊狀條帶要么是大分子量條帶前的一個(gè)拖尾現(xiàn)象。在這個(gè)純化過(guò)程中任何的物理作用都不會(huì)有效的造成視覺(jué)上可見(jiàn)的降解,引起這種情況的大多數(shù)可能來(lái)源于酶。酶引起的降解可能是血樣品長(zhǎng)時(shí)間或者不當(dāng)?shù)膬?chǔ)存導(dǎo)致的。
◆酶反應(yīng)效果差
鹽分污染
乙醇污染
◆過(guò)濾器阻塞
樣品中白細(xì)胞含量升高
將過(guò)多的相間殘留物質(zhì)移入過(guò)濾器中