產品概述:
儲存條件
Buffer VL: 細胞和病毒裂解液,室溫密閉貯存。
Buffer G-B: 蛋白沉淀液,室溫密閉貯存。
Buffer DV-A: Buffer DV 的制備液(請參照實驗準備Buffer DV配制),室溫密閉貯存。
Buffer DV: 相分離液,室溫密閉貯存。
Buffer BV: DNA結合液,室溫密閉貯存。
Buffer W1: 洗滌液,室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate: 去鹽液。使用前,按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇(可用100%乙醇或95%乙醇),混合均勻,室溫密閉貯存。
Eluent: 2.5 mM Tris-HCI, pH 8.5, 室溫密閉貯存。
流程圖
常見問題解答:
◆得率低或者得不到DNA
血液中白細胞的含量低
樣品與VL沒有充分的混勻
下相液體被上相液體污染減少了DNA與制備膜的結合
DNA過早的從膜上脫落。Buffer W2中沒有加無水乙醇或者用低濃度的乙醇代替了無水乙醇。
DNA沒有有效的被洗脫。可先將洗脫液于65℃預熱。
◆低 A260/280
樣品與VL沒有充分的混勻
樣品與DV沒有充分的混勻
樣品中白細胞的數量過多
血的用量過多
◆基因組降解
根據降解的完整性,在瓊脂糖凝膠電泳中基因組DNA要么呈現一條糊狀條帶要么是大分子量條帶前的一個拖尾現象。在這個純化過程中任何的物理作用都不會有效的造成視覺上可見的降解,引起這種情況的大多數可能來源于酶。酶引起的降解可能是血樣品長時間或者不當的儲存導致的。
◆酶反應效果差
鹽分污染
乙醇污染
◆過濾器阻塞
樣品中白細胞含量升高
將過多的相間殘留物質移入過濾器中