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  • UE DNA凝膠回收試劑盒

    產品貨號: UE-GX-10/UE-GX-50/UE-GX-250/UE-GX-500

    產品規格: 10T/50T/250T/500T

    目錄價(元):75/311/1361/2327

    大包裝詢價


產品概述:

儲存條件
Buffer DE-A: 凝膠熔化劑,含DNA保護劑,防止DNA在高溫下降解。室溫密閉貯存。
Buffer DE-B: 結合液(促使大于70bp的DNA片段選擇性結合到DNA制備膜上)。室溫密閉貯存。
BufferW1: 洗滌液,室溫密閉貯存。
Buffer W2 concentrate: 去鹽液,使用前,按試劑瓶上指定的體積加入無水乙醇(用100%乙醇或95%乙醇),混合均勻,室溫密閉貯存。
Eluent: 洗脫液,室溫密閉貯存。



流程圖



常見問題解答:


回收率低
·目的片段結合量低
通常這是因為樣品中瓊脂糖過多或者質量不好或者溶解不充分所導致。
對于小于400bp的片段回收時未加異丙醇會降低片段的結合量,因此要務必確保已加入了1倍體積量的異丙醇(100%)。
電泳緩沖液PH值過高,影響目的片段的結合。
·結合的DNA片段過早的被洗脫
buffer W2 中未加無水乙醇或者加入的乙醇不是95-100%的,都將會導致DNA片段在后續的洗滌過程中過早的被洗脫下來。因此要務必確保加入了正確的乙醇量。每次使用后應擰緊瓶蓋,以免乙醇揮發,降低回收率。
·洗脫效率低
最后一次buffer W2洗滌完后不要將制備管放于負壓裝置上抽的過干。為了提高洗脫效率可將洗脫液在65℃預熱。若用去離子水洗脫,請確保其PH值在7.0-8.5之間。
選用合適濃度的瓊脂糖凝膠電泳,上樣量不超過制備管的最大結合量(8ug)。切膠要迅速,防止紫外線對DNA的損傷。

酶切反應不理想
·鹽分殘留
可以用2×Buffer W2進行洗滌
·乙醇殘留
在最后一次Buffer W2洗滌后可將制備管由原來離心1min增加至離心2min。
·瓊脂糖殘留
為了確保完全去除瓊脂糖,應確保瓊脂糖塊在Buffer DE-A中完全溶解。切膠時盡可能只保留含有DNA片段部分的凝膠以便于對瓊脂糖的處理。
·瓊脂糖凝膠電泳呈小彌散帶
可能洗脫產物中含有ssDNA,需將洗脫產物95度加熱2min,慢慢冷卻至室溫,使單鏈DNA重新退火即可。

膜脫落
·瓊脂糖有殘留,堵塞膜孔,導致膜在高速離心時受力過大,引起膜脫落或者膜下端突出,影響DNA回收

UE質粒小量制備試劑盒中的制備管能否與UE DNA凝膠回收試劑盒中的制備管替換使用?
不能。兩種制備管都是基于硅膠膜技術,但是各自的制備管只有與各自試劑盒中的試劑盒配套才能達到最佳效果。質粒小量試劑盒結合能力最大為20μg,最長的質粒片段為50kb。膠回收試劑盒最大結合能力為8μg,最長的DNA結合片段為10kb。

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