產品概述：
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貨號 |
名稱 |
Abs/Em (nm) |
規格 |
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YP0059S |
YF®488-Phalloidin YF®488標記鬼筆環肽（綠色） |
490/515 |
50 T |
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YP0059L |
300 T |
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YP0060S |
YF®555-Phalloidin YF®555標記鬼筆環肽（橙紅） |
555/565 |
50 T |
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YP0060L |
300 T |
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YP0052S |
YF®594-Phalloidin YF®594標記鬼筆環肽（紅色） |
590/617 |
50 T |
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YP0052L |
300 T |
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YP0053S |
YF®633-Phalloidin YF®633標記鬼筆環肽（遠紅） |
630/650 |
50 T |
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YP0053L |
300 T |
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YP0123S |
YF®640-Phalloidin YF®640標記鬼筆環肽（遠紅） |
642/662 |
50 T |
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YP0123L |
642/662 |
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YP0055S |
YF®680-Phalloidin YF®680標記鬼筆環肽（近紅） |
681/698 |
50 T |
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YP0055L |
300 T |
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YP0063S |
Rhodamine-Phalloidin 羅丹明標記鬼筆環肽（橙紅） |
546/575 |
50 T |
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YP0063L |
300 T |
儲存條件：-20℃干燥、避光保存，有效期見外包裝。若配制成水溶液，應小量分裝保存。
應用范圍：細胞骨架染色
產品介紹
鬼筆環肽是從致命的傘形毒蕈蘑菇中分離出來的一種毒素，可特異性結合于F-肌動蛋白的雙環肽。因此用熒光染料標記的鬼筆環肽可以非常方便地研究F-肌動蛋白的分布。鬼筆環肽內部，在半胱氨酸和色氨酸之間含有不常見的硫醚橋形成內環結構。在pH升高時，該硫醚被裂解，鬼筆環肽失去對肌動蛋白的親和力。
YF®染料是我司開發的一系列新一代熒光染料，與其他熒光染料相比，在亮度，光穩定性和水溶性方面具有綜合優勢。YF®熒光染料標記的鬼筆環肽可在納摩爾水平染色F-肌動蛋白。在各種植物細胞或動物細胞中，標記的鬼筆環肽對大、小細絲具有相似的親和力，平均每個肌動蛋白亞基結合一個鬼筆環肽分子。不同于抗體，鬼筆環肽與肌動蛋白的結合親和力在不同物種間沒有顯著變化。非特異性染色可以忽略不計，染色和未染色區域之間的對比度非常大。鬼筆環肽將單體/聚合物的平衡轉向聚合狀態，將聚合臨界濃度降低至30倍。鬼筆毒肽類 (Phallotoxins) 可通過抑制細胞松弛素的解聚，碘化鉀和升高的溫度，穩定F-肌動蛋白。因為鬼筆環肽綴合物很小，大約直徑12-15 ?，分子量< 2000 Daltons，多種肌動蛋白結合蛋白，包括肌球蛋白，原肌球蛋白和后肌鈣蛋白依然可以和鬼筆環肽標記的肌動蛋白結合。更重要的是，鬼筆環肽標記的肌動蛋白絲保持功能，標記甘油肌纖維仍然收縮，標記的肌動蛋白絲仍然可以繼續移動。而且熒光標記的鬼筆環肽也可用于對細胞中F-肌動蛋白進行定量研究。
注意事項
1. 使用前請將產品瞬時離心至管底，再進行后續實驗。
2. 本產品為凍干粉形式，微量不易觀察，使用前請瞬時離心，加適當溶劑溶解后使用，溶解后的溶液近乎透明色。
3. 若出現染色效果不佳時，可以采用含1%BSA的PBS預孵育20-30min，可改善染色效果。
常見問題解答：
◆為什么我拿到的是空管？
本產品為凍干粉形式，微量不易觀察，使用前請瞬時離心，加適當溶劑溶解后使用。
◆鬼筆環肽染色細胞骨架過程中，能使用甲醇固定細胞嗎？
甲醇會破壞Actin蛋白，因此不能使用含有甲醇的固定液，并且使用不含甲醇的甲醛。
◆為什么用鬼筆環肽結合F-actin標記石蠟切片，沒有看到信號？
當細胞和組織經由二甲苯或丙酮之類的溶劑處理時（例如組織切片脫石蠟期間），它通過阻止鬼筆環肽結合的方式來影響F-actin。可以使用通常不用有機溶劑洗滌的冷凍切片代替石蠟切片，或者可以使用抗肌動蛋白抗體。
◆鬼筆環肽染料能重復利用嗎？
正常情況下染色液在使用后，可能會影響染色效果，最好不要重復使用；我們的鬼筆環肽按說明書添加，濃度較低，這是染料不能重復利用的原因。
◆鬼筆環肽染色F-Actin, 有的染上，有的沒染上，并且染色信號較弱怎么辦？
（1）可能是染料濃度低或孵育時間不足，建議增加染料濃度或培養時間。
（2）可能是在錯誤的波長下分析細胞，建議重新檢查過濾器設置是否正確。
◆不進行透化步驟，鬼筆環肽直接染色固定后的細胞可以嗎？
熒光標記的phalloidins，只能用于在固定透化后的組織切片、細胞培養和無細胞實驗中染色F-actin。
◆染色后，沒有熒光信號怎么辦？
（1）檢查儲液、工作液配制是否有誤。
（2）固定及透化步驟尤為重要，使用新鮮配置的4%多聚甲醛進行固定，使用新鮮配置的0.5% Triton X-100 進行透化。摸索最佳的固定及透化時間。
（3）摸索最佳染色工作液濃度及染色時間。
◆可以用于做流式細胞嗎？
該產品主要是用于微絲的染色，一般用熒光顯微鏡觀察結果，不推薦用流式檢測。
◆可以用普通熒光顯微鏡觀察嗎？
普通的熒光顯微鏡也是可以檢測的，激光共聚焦拍照效果會更好一些。
◆探針的濃度是多少？
請按照說明書的稀釋比例進行使用，具體濃度信息未知。
使用本產品的文獻：
Nature Communications volume 11
Yuetian Liu, Lijuan Du, Hua Zhang, Guanrong Li, Yang Luo, Zeming Hu, Rong Xu, Jie Yao, Zheyuan Shi, Yige Chen, Chi Zhang, Zhanping Jin, Caihua Zhang, Chanchan Xie, Jun Fu, Yabin Zhu and Yingchun Zhu
Renshuai Hua, Chenxi Zhao, Zhengyu Xu, Derong Liu, Wenyuan Shen, Wenlu Yuan, Yan Li, Jun Ma, Zhishuo Wang, Shiqing Feng
Ruixin Zhang, Shunshun Yan, Shichun Li, Yu Shi, Yueyue Yang, Junwu Liu, Zixuan Dong,Ting Wang, Jingxin Yue, Quhan Cheng, Ye Wan, Su Zhang, Shanshan Kang, Deling Kong, Kai Wang, Xiaoling Fu
參考文獻：
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and TissUEs
應用方向：人體組織切片，心臟大鼠心肌細胞和密集生長的神經元培養物
2.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
應用方向：組織切片、動物細胞、植物細胞
3.A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
應用方向：哺乳動物細胞：小鼠脾B細胞
4.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
應用方向：組織切片
5.Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
應用方向：組織切片
6.F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
應用方向：植物細胞
7.A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
應用方向：哺乳動物細胞： 原代人類成纖維細胞
8.A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
應用方向：釀酒酵母菌細胞
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