產品概述:
產品參數
外觀:可溶于乙醇、DMF、DMSO的深紅色固體
Ex/Em (MeOH) = 549/565 nm
CAS號:41085-99-8
分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.9
分子結構圖:
儲存條件
-20℃避光保存,有效期見外包裝。
產品介紹
DiI作為示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer),可以被廣泛用于正向或逆向、活的或固定的神經等細胞或組織。DiI通常不會影響細胞的生存力(viability)。被DiI標記的神經細胞在體外培養的條件下可以存活長達4周,在體內可以長達一年。DiI在被固定的神經元細胞膜上的遷移速率為0.2-0.6 mm/day,在活的神經元細胞膜上的的遷移速率為6 mm/day。
DiI除了用于細胞膜熒光標記外,還可用于檢測細胞的融合和粘附、發育或移植過程中細胞的遷移,通過FRAP(光脫色熒光恢復技術)檢測脂在細胞膜上的擴散,檢測細胞毒性和標記脂蛋白等。
DiI染色后可進行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他試劑)的固定,但不建議在染色后進行透化的過程。此外,在固定透化(室溫下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地進行質膜染色。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液濃度10 μM計算,10 mg配置為工作液大概可以用10707次。
注意事項
1. 使用前請將產品瞬時離心至管底,再進行后續實驗。
2. DiI染色固定的細胞或組織樣品時,通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進行固定,使用其它不適當的固定液會導致熒光背景較高。
3. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆在細胞膜和細胞核雙染實驗中,細胞膜染色用DiI,細胞核染色用DAPI,細胞固定后,先染色DiI還是先染色DAPI?
先用DiI對細胞膜進行染色,后用DAPI染核
◆DiI細胞膜染料,除了在549nm下有紅光外,在488nm下有綠色嗎?
該染料在488nm激發處,有微弱的激發,如果染料濃度太大或者曝光太強的話,會在488nm處有微弱的熒光,建議調整曝光和染料濃度
◆DiI也可以染色細胞內的細胞器膜嗎?
可以,因為DiI染色細胞膜是非特異性的,所以細胞器的膜也會被染上色,如果不想細胞器染色太明顯,可以減少孵育時間或者將染料濃度降低
◆細胞追蹤有很多產品,該如何選擇?
首先確定追蹤細胞的時間,然后考慮染料結合機制。
1.鈣黃綠素染料(C4041)標記均勻且對短期細胞遷移示蹤效果極佳,但也會被某些類型細胞迅速外排。
2.親脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能標記細胞膜而不破壞其功能,并且能持續更長時間,但如果發生膜融合則可能會染上其他細胞。此外,它們還會在透化過程中丟失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于長期標記,其帶有溫和的氯甲基反應基團使之能夠與細胞組分共價結合。
4.CFDA SE(C4070)也能共價地結合于細胞組分。
在所有列出的試劑中,細胞內保留與否取決于細胞分裂的速率和細胞的固有特性(主動外排,膜和蛋白質的周轉率等)。其中共價結合試劑比非共價結合的試劑展現出更長的保留時間
使用本產品的文獻:
1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang,Xiaoyou Wang,Jie Li,Yu Nie,Guojian Liao,Yang Yu,Chong Li
ACS NANO
應用方向:細胞膜染色
- Yixuan Tang ,
- Shuang Wu ,
- Jiaqi Lin ,
- Liting Cheng ,
- Jing Zhou ,
- Jing Xie ,
- Kexin Huang ,
- Xiaoyou Wang ,
- Yang Yu ,
- Zhangbao Chen ,
- Guojian Liao , and
- Chong Li*
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
應用方向:標記示蹤
應用方向:細胞遷移
應用方向:細胞融合
應用方向:細胞粘附
應用方向:FRAP檢測脂在細胞膜上的擴散
應用方向:標記脂蛋白
應用方向:DiI標記外泌體,注射入小鼠海馬齒狀回(DG)區,觀察外泌體在皮質層的遷移