產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品參數(shù)
外觀:黃色固體。DiO溶于無水乙醇、無水DMSO和無水DMF,在無水DMSO中的溶解度約為10 mg/mL。較難溶解時(shí),可以適當(dāng)加熱或者超聲處理。
Ex/Em (MeOH) = 484/501 nm
CAS號(hào):34215-57-1
分子式:C53H85ClN2O6
分子量:881.7
分子結(jié)構(gòu)圖:
儲(chǔ)存條件
4℃避光保存,有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
DiO作為示蹤劑或長期示蹤劑,被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織。DiO通常不會(huì)顯著影響細(xì)胞的生存力。DiO除了細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可用于檢測細(xì)胞的融合和粘附,發(fā)育或移植過程中的細(xì)胞遷移,通過FRAP(光脫色熒光恢復(fù)技術(shù))檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。
DiO染色后可進(jìn)行多聚甲醛(不可使用甲醇等其他試劑)的固定,但不建議在染色后進(jìn)行透化的過程。此外,在固定透化(室溫下用0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地進(jìn)行質(zhì)膜染色。DiO染色強(qiáng)度通常低于DiI,有時(shí)在固定組織中會(huì)完全喪失。
以每次使用100 μL染色工作液,染色工作液濃度10 μM計(jì)算,10 mg配置為工作液大概可以用11341次。
注意事項(xiàng)
1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底,再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. DiO染色固定的細(xì)胞或組織樣品時(shí),通常使用配制在PBS中的4%多聚甲醛進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?huì)導(dǎo)致熒光背景較高。
3. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
4. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆用PBS稀釋后的DiO工作液染色時(shí)出現(xiàn)聚沉現(xiàn)象,怎么處理?
因?yàn)檫@類細(xì)胞膜染料在水中的溶解性不好,建議用PBS稀釋時(shí)稍微加入一點(diǎn)DMSO有機(jī)溶劑,來增加其溶解度
◆固定后的細(xì)胞,可以用DiO進(jìn)行染色嗎?
該類細(xì)胞膜染料可以染色固定后的細(xì)胞樣本,但如果固定過程中,細(xì)胞膜破損,會(huì)影響染色的效果
◆DiO也可以染色細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞器膜嗎?
可以,因?yàn)镈iO染色細(xì)胞膜是非特異性的,所以細(xì)胞器的膜也會(huì)被染上色,如果不想細(xì)胞器染色太明顯,可以減少孵育時(shí)間或者將染料濃度降低
◆細(xì)胞追蹤有很多產(chǎn)品,該如何選擇?
首先確定追蹤細(xì)胞的時(shí)間,然后考慮染料結(jié)合機(jī)制。
1.鈣黃綠素染料(C4041)標(biāo)記均勻且對短期細(xì)胞遷移示蹤效果極佳,但也會(huì)被某些類型細(xì)胞迅速外排。
2.親脂性的花青素染料,如DiI(D4010),DIO(D4007),DiA(D4059),DiD(D4019),DiR(D4006)能標(biāo)記細(xì)胞膜而不破壞其功能,并且能持續(xù)更長時(shí)間,但如果發(fā)生膜融合則可能會(huì)染上其他細(xì)胞。此外,它們還會(huì)在透化過程中丟失。
3.CellTracker染料(C4060)更有利于長期標(biāo)記,其帶有溫和的氯甲基反應(yīng)基團(tuán)使之能夠與細(xì)胞組分共價(jià)結(jié)合。
4.CFDA SE(C4070)也能共價(jià)地結(jié)合于細(xì)胞組分。
在所有列出的試劑中,細(xì)胞內(nèi)保留與否取決于細(xì)胞分裂的速率和細(xì)胞的固有特性(主動(dòng)外排,膜和蛋白質(zhì)的周轉(zhuǎn)率等)。其中共價(jià)結(jié)合試劑比非共價(jià)結(jié)合的試劑展現(xiàn)出更長的保留時(shí)間
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn):
1.Overcoming the Reticuloendothelial System Barrier to Drug Delivery with a “Don’t-Eat-Us” Strategy
Yixuan Tang,Xiaoyou Wang,Jie Li,Yu Nie,Guojian Liao,Yang Yu,Chong Li
ACS NANO
應(yīng)用方向:細(xì)胞膜染色
Yanhua Li,Xia Zhang,Xiuyan Wan,Xiaohan Liu,Wei Pan,Na Li,Bo Tang
Adv. Funct. Mater.
3.Curved Nanofiber Network Induces Cellular Bridge Formation to Promote Stem Cell Mechanotransduction
Qian Sun Fang Pei, Man Zhang, Bo Zhang, Ying Jin, Zhihe Zhao , Qiang Wei
Advanced Science
4.Enzyme-Dynamic Extracellular Vesicles for Metalloimmunotherapy of Malignant Pleural Effusions
- Jiexin Li,
- Ruiqi Yang,
- Fuqiang Dong,
- Qian Qiu,
- Zhen Jiang,
- He Ren,
- Chen Zhang,
- Gengqi Liu,
- Jonathan F. Lovell, and Yumiao Zhang
1.Optimizing conditions and avoiding pitfalls for prolonged axonal tracing with carbocyanine dyes in fixed rat spinal cords
應(yīng)用方向:標(biāo)記示蹤
應(yīng)用方向:細(xì)胞遷移
應(yīng)用方向:細(xì)胞毒性
應(yīng)用方向:標(biāo)記的神經(jīng)細(xì)胞外泌體
應(yīng)用方向:用DiO進(jìn)行外泌體染色,通過熒光的強(qiáng)弱對不同來源樣品中的外泌體進(jìn)行定量分析