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  • YF? 633-Phalloidin YF? 633標記鬼筆環肽(遠紅)

    產品貨號: YP0053S/YP0053L

    產品規格: 50T/300T

    目錄價(元):589/2063

    推薦儀器:熒光顯微鏡

    大包裝詢價


產品概述:

貨號

名稱

Abs/Em (nm)

規格

YP0059S

YF®488-Phalloidin

YF®488標記鬼筆環肽(綠色)

490/515

50 T

YP0059L

300 T

YP0060S

YF®555-Phalloidin

YF®555標記鬼筆環肽(橙紅)

555/565

50 T

YP0060L

300 T

YP0052S

YF®594-Phalloidin

YF®594標記鬼筆環肽(紅色)

590/617

50 T

YP0052L

300 T

YP0053S

YF®633-Phalloidin

YF®633標記鬼筆環肽(遠紅)

630/650

50 T

YP0053L

300 T

YP0123S

YF®640-Phalloidin

YF®640標記鬼筆環肽(遠紅)

642/662

50 T

YP0123L

642/662

YP0055S

YF®680-Phalloidin

YF®680標記鬼筆環肽(紅)

681/698

50 T

YP0055L

300 T

YP0063S

Rhodamine-Phalloidin 羅丹明標記鬼筆環肽(橙紅)

546/575

50 T

YP0063L

300 T


儲存條件:-20℃干燥、避光保存,有效期見外包裝。若配制成水溶液,應小量分裝保存。


應用范圍:細胞骨架染色


產品介紹

鬼筆環肽是從致命的傘形毒蕈蘑菇中分離出來的一種毒素,可特異性結合于F-肌動蛋白的雙環肽。因此用熒光染料標記的鬼筆環肽可以非常方便研究F-肌動蛋白的分布。鬼筆環肽內部,在半胱氨酸和色氨酸之間含有不常見的硫醚橋形成內環結構。在pH升高時,該硫醚被裂解,鬼筆環肽失去對肌動蛋白的親和力。

YF®染料是我司開發的一系列新一代熒光染料,與其他熒光染料相比,在亮度,光穩定性和水溶性方面具有綜合優勢。YF®熒光染料標記的鬼筆環肽可在納摩爾水平染色F-肌動蛋白。在各種植物細胞或動物細胞中,標記的鬼筆環肽對大、小細絲具有相似的親和力,平均每個肌動蛋白亞基結合一個鬼筆環肽分子。不同于抗體,鬼筆環肽與肌動蛋白的結合親和力在不同物種間沒有顯著變化。非特異性染色可以忽略不計,染色和未染色區域之間的對比度非常大。鬼筆環肽將單體/聚合物的平衡轉向聚合狀態,將聚合臨界濃度降低至30倍。鬼筆毒肽類 (Phallotoxins) 可通過抑制細胞松弛素的解聚,碘化鉀和升高的溫度,穩定F-肌動蛋白。因為鬼筆環肽綴合物很小,大約直徑12-15 ?,分子量< 2000 Daltons,多種肌動蛋白結合蛋白,包括肌球蛋白,原肌球蛋白和后肌鈣蛋白依然可以和鬼筆環肽標記的肌動蛋白結合。更重要的是,鬼筆環肽標記的肌動蛋白絲保持功能,標記甘油肌纖維仍然收縮,標記的肌動蛋白絲仍然可以繼續移動。而且熒光標記的鬼筆環肽也可用于對細胞中F-肌動蛋白進行定量研究。


注意事項

1. 使用前請將產品瞬時離心至管底,再進行后續實驗。

2. 本產品為凍干粉形式,微量不易觀察,使用前請瞬時離心,加適當溶劑溶解后使用,溶解后的溶液近乎透明色。

3. 若出現染色效果不佳時,可以采用含1%BSAPBS預孵育20-30min可改善染色效果。




說明書:


 UE-YP0053S/YP0053L    

常見問題解答:


為什么我到的是空管

本產品為凍干粉形式,微量不易觀察,使用前請瞬時離心,加適當溶劑溶解后使用

鬼筆環肽染色細胞骨架過程中,能使用甲醇固定細胞嗎?

甲醇會破壞Actin蛋白,因此不能使用含有甲醇的固定液,并且使用不含甲醇的甲醛。


為什么用鬼筆環肽結合F-actin標記石蠟切片,沒有看到信號?
當細胞和組織經由二甲苯或丙酮之類的溶劑處理時(例如組織切片脫石蠟期間),它通過阻止鬼筆環肽結合的方式來影響F-actin。可以使用通常不用有機溶劑洗滌的冷凍切片代替石蠟切片,或者可以使用抗肌動蛋白抗體。

鬼筆環肽染料能重復利用嗎?
正常情況下染色液在使用后,可能會影響染色效果,最好不要重復使用;我們的鬼筆環肽按說明書添加,濃度較低,這是染料不能重復利用的原因。

鬼筆環肽染色F-Actin, 有的染上,有的沒染上,并且染色信號較弱怎么辦?
(1)可能是染料濃度低或孵育時間不足,建議增加染料濃度或培養時間。
(2)可能是在錯誤的波長下分析細胞,建議重新檢查過濾器設置是否正確。

不進行透化步驟,鬼筆環肽直接染色固定后的細胞可以嗎?
熒光標記的phalloidins,只能用于在固定透化后的組織切片、細胞培養和無細胞實驗中染色F-actin。

染色后,沒有熒光信號怎么辦?
(1)檢查儲液、工作液配制是否有誤。
(2)固定及透化步驟尤為重要,使用新鮮配置的4%多聚甲醛進行固定,使用新鮮配置的0.5% Triton X-100 進行透化。摸索最佳的固定及透化時間。
(3)摸索最佳染色工作液濃度及染色時間。

可以用于做流式細胞嗎?
該產品主要是用于微絲的染色,一般用熒光顯微鏡觀察結果,不推薦用流式檢測。

可以用普通熒光顯微鏡觀察嗎?
普通的熒光顯微鏡也是可以檢測的,激光共聚焦拍照效果會更好一些。

探針的濃度是多少?
請按照說明書的稀釋比例進行使用,具體濃度信息未知。



使用本產品的文獻:


Multifaceted Characterization of the Signatures and Efficacy of Mesenchymal Stem/Stromal Cells in Acquired Aplastic Anemia
Stem Cell Research & Therapy


參考文獻:
1.4D Super-Resolution Microscopy with Conventional Fluorophores and Single Wavelength Excitation in Optically Thick Cells and TissUEs
應用方向:人體組織切片,心臟大鼠心肌細胞和密集生長的神經元培養物

2.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
應用方向組織切片、動物細胞、植物細胞

3.A balance of Btk and SHIP activation regulates B-cell receptor cluster formation by controlling actin remodeling
應用方向哺乳動物細胞:小鼠脾B細胞

4.Fluorescent phallotoxins as probes for filamentous actin
應用方向組織切片

5.Formation of actin clusters in rat liver parenchymal cells on phalloidin poisoning as visualized by a fluorescent phallotoxin
應用方向組織切片

6.F-actin architecture in coleoptile epidermal cells
應用方向植物細胞

7.A Rac switch regulates random versus directionally persistent cell migration
應用方向哺乳動物細胞: 原代人類成纖維細胞

8.A role for actin, Cdc1p, and Myo2p in the inheritance of late Golgi elements in Saccharomyces cerevisiae.
應用方向釀酒酵母菌細胞

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