產品概述：
產品內容
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組分 |
規格 |
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A. DCFH-DA（10 mM） |
0.1 mL |
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B. 活性氧陽性對照（Rosup 100 mM） |
1 mL |
產品參數
Ex/Em：504/529 nm
儲存條件
-20℃避光保存，有效期見外包裝。
產品介紹
DCFH-DA（二氯二氫熒光素-乙酰乙酸酯）本身無熒光，可自由透過活細胞膜進入細胞內，并被細胞內的酯酶水解，形成 DCFH，DCFH 無熒光且不能通透細胞膜，從而被細胞內的活性氧氧化生成有熒光的 DCF。根據活細胞中熒光的產生，可以判斷細胞活性氧的含量和變化。用流式細胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察，是一種經典的組織或活細胞中活性氧檢測方法。Rosup 為活性氧陽性誘導藥物，根據其熒光信號強度，可分析活性氧的真正水平。
注意事項
1. 陽性對照 Rosup 一般使用濃度為 100 μM（推薦濃度 100-400 μM，具體依細胞類型而定）。通常刺激后 30 min-4 h 可以觀察到顯著的活性氧水平升高。對于不同的細胞，活性氧陽性對照的效果可能有較大的差別。如果在刺激后 30 min 內觀察不到活性氧的升高，可延長誘導時間或適當提高活性氧陽性對照的濃度。如果活性氧升高得過快，可縮短誘導時間或適當降低活性氧陽性對照的濃度。
2. 實驗過程中，如果發現沒有刺激的陰性對照細胞熒光也比較強，可以按照 1:2000-1:5000 稀釋 DCFH-DA，使 DCFH-DA 的終濃度為 2-5 μM。探針裝載的時間也可以根據情況在 15-60 min 內適當進行調整。
3. 活性氧陽性對照（Rosup）僅僅用于作為陽性對照的樣品，并不是在每個樣品中都需加入活性氧陽性對照。
4. 探針裝載后，一定要洗凈殘余的未進入細胞內的探針，否則會導致背景較高。
使用本產品的文獻：
1.Identification of a new natural biflavonoids against breast cancer cells induced ferroptosis via the mitochondrial pathway
Yang Xie，Xi Zhou，Jing Li，Xiao-Chang Yao，Wan-Li Liu，Feng-Hua Kang，Zhen-Xing Zou，Kang-Ping Xu，Ping-Sheng Xu，Gui-Shan Tan
Bioorganic Chemistry Volume 109, April 2021, 104744
2. Transcriptional characteristics and functional validation of three monocyte subsets during aging.
Chen Wang, Yating Cheng , Boyu Li , Xueping Qiu , Hui Hu , Xiaokang Zhang , Zhibing Lu and Fang Zheng
Wang et al. Immunity & Ageing (2023) 20:50
3. The immunomodulatory efects of metformin in LPS?induced macrophages: an in vitro study.
Zhiyong Wang , Min Wang , Mao Lin , Pei Wei
Infammation Research
Qian Qiu, Jiexin Li, He Ren, Jingyu Zhang, Gengqi Liu, Ruiqi Yang, Boyang Sun, Chen Zhang, Yumiao Zhang
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