產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品內(nèi)容
規(guī)格 組分 |
C6034S (20T) |
C6034L (500T) |
A. CFDA SE |
1管 |
1管× 5 |
B. CFDA SE溶劑 |
20 μL |
500 μL |
C. 10× CFDA SE Buffer |
1 mL ×2 |
50 mL |
儲存條件
-20℃避光保存,有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒是基于CFDA SE對細(xì)胞進(jìn)行增殖及示蹤檢測的試劑盒,本試劑盒由CFDA SE粉末、溶劑及染色緩沖液組成。
CFDA SE是二乙酸熒光素(Fluorescein diacetate,F(xiàn)DA)的衍生物,具有細(xì)胞膜滲透性,本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)CFDA SE穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后,可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ester,CFSE),可發(fā)強烈的綠色熒光,不能穿透細(xì)胞膜,能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基共價結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上。同時,過量且未被偶聯(lián)的CFDA SE通過被動擴散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi),被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標(biāo)記的時間可達(dá)數(shù)月,因此非常適用于細(xì)胞群落分析。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一,優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26,并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也很均一。在細(xì)胞分裂增殖過程中,CFSE標(biāo)記熒光可平均分配至兩個子代細(xì)胞中,熒光強度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半,通過流式細(xì)胞儀(FL1通道)根據(jù)熒光強度的不同,可檢測出未分裂細(xì)胞,分裂一次(1/2的熒光強度),二次(1/4的熒光強度),三次(1/8的熒光強度),以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFDA SE可檢測分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究,且具有不會使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA SE最常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測,也可用于成纖維細(xì)胞,NK細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測。
CFDA SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光,除了流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞增殖外,還可用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。
注意事項
1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時離心至管底,再進(jìn)行后續(xù)實驗。
3. CFDA SE溶劑在4oC、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25oC水浴溫育片刻至全部融解后方可使用。
4. 本試劑盒對CFDA SE染色體系做了優(yōu)化處理,但建議使用者根據(jù)自身的細(xì)胞類型,培養(yǎng)條件以及應(yīng)用方向來梯度摸索最佳的工作濃度及染色時間。不同的細(xì)胞其細(xì)胞內(nèi)酯酶活性不同,因此染色效果具有差異性。
5. 熒光染料均存在淬滅問題,操作過程中請注意避光,以減緩熒光淬滅。
6. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆CFDA SE細(xì)胞標(biāo)記液的配制是必須用純水,還是用PBS就可以?
必須用細(xì)胞培養(yǎng)級純水
◆能否用于干細(xì)胞的增殖檢測?
CFDA SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測試劑盒可以用于各種常見細(xì)胞的增殖和示蹤檢測,包括干細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等
◆您好,我用肝素全血做淋轉(zhuǎn),可以用這個標(biāo)記嗎?具體步驟跟這個一樣嗎?
肝素全血做淋轉(zhuǎn)相關(guān)實驗建議老師參考文獻(xiàn)資料確定,這邊暫時沒有相關(guān)步驟提供給您的,目前該探針主要用于細(xì)胞增殖的標(biāo)記
◆嘗試在懸浮狀態(tài)下標(biāo)記細(xì)胞,并通過CFDA SE標(biāo)記來追蹤它們,但標(biāo)記后它們將不再粘附在表面上(而未標(biāo)記的細(xì)胞粘附良好),試過在10和20μM處標(biāo)記,這是什么原因造成的?
這種染料將通過伯胺與蛋白質(zhì)結(jié)合,濃度過高會導(dǎo)致細(xì)胞毒性或細(xì)胞功能的意外改變。解決方案是減少濃度或染色時間,或使用非蛋白結(jié)合追蹤試劑