產品概述：
產品內容
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組分 |
L6023S (30T) |
L6023M (150T) |
L6023L (300T) |
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A. Calcein AM (4 mM in anhydrous DMSO) |
10 μL |
50 μL |
100 μL |
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B. Ethidium homodimer-I (EthD-I) (2 mM in DMSO/H2O 1:4 (v/v)) |
30 μL |
150 μL |
300 μL |
注：本試劑盒次數是按照流式細胞儀一個樣品使用0.5 mL工作液規定的。
光譜信息
Calcein AM: Ex/Em = 494/517 nm；EthD-I: Ex/Em = 528/617 nm（結合DNA）。
儲存條件
-20?C避光保存。注意Calcein AM容易水解，需密封干燥保存，稀釋工作液需當天配制。有效期見外包裝。
產品介紹
Live & DeadTM動物細胞活力/毒性檢測試劑盒（Calcein AM, EthD-I）是一種為動物細胞死活檢測提供雙熒光染色的試劑盒。試劑盒內的兩種探針可分別測定細胞內酯酶活性和質膜完整性從而反映細胞活力。本試劑盒可用于熒光顯微鏡、流式細胞儀、酶標儀以及其他熒光檢測系統。
本試劑盒可以應用于大多數的真核哺乳動物細胞，包括貼壁細胞核的某些組織，但不適用于真菌和酵母。該試劑盒與相同用處的臺盼藍相比，更快捷安全且靈敏度更高。
注意事項
1. 使用前請將產品瞬時離心至管底，再進行后續實驗。
2. 酚紅或血清對于本試劑盒的檢測有一定的干擾。
3. 熒光染料均存在淬滅問題，實驗操作時請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
常見問題解答：
◆你們家有兩款哺乳動物死活染色試劑盒，分別是Calcein AM，PI（貨號L6037）與Calcein AM，EthD-1（貨號L6023，這兩者的區別是什么？
EthD-1相較于PI來說，對DNA的親和力更高，低濃度下即可滿足染色效果。
◆我如何為LIVE/DEAD細胞活力實驗準備死細胞對照？
有兩種簡單的方法。一種是通過60°C放置20分鐘熱滅活細胞。第二種是將細胞放入70%乙醇。乙醇固定的細胞可以在冰箱中無限期儲存直到使用，可達好幾年。
步驟：
a.離心細胞、使細胞沉淀并去除上清
b.固定細胞：在15mL含有細胞團的試管中加入10 mL70%冰乙醇，先開始逐滴加入后震蕩，混合均勻。
c.在冰箱中儲存直到使用。
d.快使用時，水洗兩次且在選擇的緩沖液中重懸。
◆用該試劑盒染色后，可以進行后續固定步驟嗎？
染色后不可以進行固定步驟。PI作為膜非透性染料，固定后將轉移到所有細胞，不再維持死細胞特異性染色。
使用本產品的文獻：
1.Regional and sustained dual-release of growth factors from biomimetic tri-layered scaffolds for the repair of large-scale osteochondral defects
Yunsheng Dong，Xun Sun，Zhiling Zhang，Yufei Liu，Lin Zhang，Xiangyun Zhang，Ying Huang，Yanhong Zhao，Chunxiao Qi，Adam C.Midgley，Shufang Wang，Qiang Yang
Applied materials today（Volume 19, June 2020, 100548）
應用方向：仿生三層支架上hUCMSCs細胞死活染色
2.PEG Linker Improves Antitumor Efficacy and Safety of Affibody-Based Drug Conjugates
Qiyu Li,Wenjing Li,Keyuan Xu,Yutong Xing,Haobo Shi,Zhe Jing,Shuang Li，Zhangyong Hong
International Journal of Molecular Sciences
3.Multifunctional Injectable Hydrogel Loaded with Cerium-Containing Bioactive Glass Nanoparticles for Diabetic Wound Healing
Yue-Hua Chen,Zhou-Feng Rao,Yu-Jie Liu,Xiang-Sheng Liu,Yu-Fei Liu,Lan-Ju Xu,Ze-Qi Wang,Jing-Yue Guo,Lin Zhang,Yun-Sheng Dong,Chun-Xiao Qi,Chao Yang,Shu-Fang Wang
Biomolecules 2021, 11(5), 702
4.Impact of an engineered micro-patterned interface on chitosan/glycerol membranes for wound healing
Author links open overlay panelJunjieCai，BoLiu，WeiLiu，LinaLiu，ZheFan
Surfaces and Interfaces
Chun Liu, Su Ni, Xiaoyu Wu, Linxiang Zhang, Ting Dai, Aiqin Wang, Hongbin Zhao
參考文獻:
1.Visualization of keratocytes in the human cornea with fluorescence microscopy
應用方向：角膜組織切片染色
2.Effect of matrix metalloproteinases activity on outflow in perfused human organ culture
應用方向：死活細胞染色:評估培養物生存力
3.Metabolizing enzyme toxicology assay chip (MetaChip) for high-throughput microscale toxicity analyses
應用方向：死活細胞染色:高通量微量毒性分析
4.Quantification of effector/target conjugation involving natural killer (NK) or lymphokine activated killer (LAK) cells by two-color flow cytometry
應用方向：流式細胞儀分析死活細胞能力
5.Nanoclay Reinforced Integrated Scaffold for Dual-Lineage Regeneration of Cartilage and Subchondral Bone
Xueling Yin, Wanting Xia, Huimin Fan, Xiaoyu Yang, Kaiwen Xiang, Ye Ren and Zhihong Zhu
6.Strontium-Modified porous attapulgite composite hydrogel scaffold with advanced angiogenic and osteogenic potential for bone defect repair
Chun Liu,Su Ni,Xiaoyu Wu,Linxiang Zhang,Ting Dai,Aiqin Wang,Hongbin Zhao
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