產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品參數(shù)
外觀:可溶于水的淺黃色固體
Ex/Em:328/533 nm
CAS號:115144-35-9
分子式:C11H7N2O3S2K
分子量:318.4
分子結(jié)構(gòu)圖:

儲存條件
-20℃ 干燥避光保存,有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
D-Luciferin是螢光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)活體成像技術(shù)。在ATP和螢光素酶的作用下,螢光素能夠被氧化,并且在560 nm檢測到其化學發(fā)光。Luciferin由luc基因編碼,該基因作為報告基因在多種細胞中存在。由于化學發(fā)光的低背景性,luc基因在很低的表達水平下就可以被監(jiān)測到。此外,螢光素/螢光素酶被用來測量10-15摩爾量的ATP。
注意事項
1. D-Luciferin, Potassium Salt樣品的背景熒光主要來源于螢光素,如果不立即使用本產(chǎn)品,建議分裝后,-20℃避光保存。
常見問題解答:
◆底物的激發(fā)波長和發(fā)射長?
化學發(fā)光,無需激發(fā)波長。螢火蟲螢光素發(fā)射波長是 560 nm。
◆推薦儀器?多功能酶標儀能用嗎?
1、推薦儀器:具有生物化學發(fā)光檢測模塊。螢光素產(chǎn)生的光可以被光度計或閃爍計數(shù)器檢測。常見的活體成像儀器:如 IVIS? Lumina 小動物活體成像系統(tǒng),德國 Bruker公司的 In-Vivo Xtreme 多模式小動物活體成像儀。
2、多功能酶標儀:需要和儀器廠家確認是否具體生物化學發(fā)光檢測模塊。注:不能用熒光顯微鏡。
◆底物可以進入活細胞中或者血腦屏障嗎?
D-螢光素約280道爾頓,螢光素的水溶性和脂溶性都非常好,可以通過血腦屏障,胎盤屏障和血液測試屏障,也可以進入活細胞。
◆活體成像實驗,無效果的原因?
成功進行活體成像實驗需要以下條件:
1)目的組織或細胞表達螢光素酶基因;
2)螢光素底物注射成功;
3)依賴于發(fā)光部位的組織厚度。實驗不成功,可從上述因素查找,螢光素酶基因是否表達,螢光素底物是否未正確注射,及發(fā)光部位較深等
◆產(chǎn)品不小心放在室溫下或暴露在光線下了,還可以用嗎?
產(chǎn)品在室溫下可以穩(wěn)定保存很多天,因此產(chǎn)品很可能仍然可以正常工作。 為安全起見,我們建議在處理大量樣品或珍貴樣品之前,先進行小規(guī)模陽性對照實驗,以確認該產(chǎn)品仍然適用于您的應用。
◆兩者的區(qū)別是什么?
螢光素鉀鹽和螢光素鈉鹽應用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發(fā)表的文獻來看,鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽,尤其是體內(nèi)實驗,兩者功效相同。
◆活體成像有必要建立螢光素酶動力學曲線嗎?
注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做螢光素酶動力學曲線,確定最佳信號平臺期和最佳的檢測時間。
使用本產(chǎn)品的文獻:
參考文獻
1.1,25-Dihydroxyvitamin D Down-regulates Cell Membrane Growth- and Nuclear Growth-promoting Signals by the Epidermal Growth Factor Receptor
應用方向:熒光素酶活性檢測:啟動子研究
2.Optical imaging of Renilla luciferase reporter gene expression in living mice
應用方向:活體成像
3.Real-time measurements of acetylcholine-induced release of ATP from bovine medullary chromaffin cells
應用方向:高靈敏度 ATP 分析