產品概述:
儲存條件
4℃避光保存,有效期見外包裝。
產品介紹
1× Tyramide Amplification Buffer為即用型緩沖液,主要用于通過酪酰胺信號放大技術對細胞和組織進行的免疫染色。只需在該緩沖液中稀釋酪酰胺化合物即可制成工作液。
按每個樣品使用100 μL計算,2 mL 1×Tyramide Amplification Buffer可以做20個樣品,20 mL可以做200個樣品。
實驗步驟
以下方案針對96孔板中的固定細胞或大小約10 mm×10 mm的組織切片,可以根據樣本的大小按比例縮放。
1. 根據樣本和抗體執行相應的固定、封閉和抗體標記的步驟。樣品必須用抗體或鏈霉親和素耦合的HRP結合物標記。我們建議使用我司酪酰胺信號放大試劑盒進行最佳的封閉和二抗標記。
2. 抗體(鏈霉親和素)-HRP結合物標記后,用洗滌緩沖液1×PBS洗滌樣品3次,每次5 min。
3. 用1× Tyramide Amplification Buffer將染料-酪酰胺探針制成工作溶液。染料-酪酰胺探針的終濃度可以根據具體應用而改變。向96孔板的每個孔中或每個組織切片上加入100 μL工作液。工作溶液可在室溫下避光保存長達24 h。
4. 室溫避光孵育10 min。
5. 用洗滌緩沖液1×PBS洗滌樣品3次,每次5 min。
6. 可選:如果使用Biotin-酪酰胺,可使用熒光標記的鏈霉親和素進行熒光顯色,也可使用含HRP的鏈霉親和素標記,后使用DAB顯色。
7. 顯微鏡成像。對于載玻片上的組織樣本,請蓋上蓋玻片并密封后,再顯微鏡成像。
注意事項
1. 使用前請將產品瞬時離心至管底,再進行后續實驗。