產(chǎn)品概述:
產(chǎn)品參數(shù)
外觀:白色/黃色/淡黃色固體
Ex/Em(結(jié)合DNA)= 352/461 nm
Ex/Em(未結(jié)合DNA)= 346/460 nm
CAS號:23491-45-4
分子式:C25H24N6O ? 3HCl
分子量:533.9
分子結(jié)構(gòu)圖:
儲存條件
-20℃避光保存,有效期見外包裝。
產(chǎn)品介紹
Hoechst 33258,也稱bis Benzimide H 33258或HOE 33258,是一種非嵌入性的亮藍(lán)色熒光染料。染料在溶液中熒光較弱,它們在活細(xì)胞中DNA聚AT序列富集區(qū)域的小溝處與DNA結(jié)合后熒光變得明亮,故此類染料也被稱為DNA探針。因背景較低,故染色細(xì)胞不需洗滌步驟,且染色非常穩(wěn)定,對活細(xì)胞無毒,結(jié)合DNA染色后可持續(xù)幾天或更長時(shí)間。Hoechst 33258與Hoechst 33342相比在水中的溶解度要高,但兩種染料均具有高細(xì)胞膜滲透性,被廣泛用于細(xì)胞凋亡檢測,染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。
以貼壁細(xì)胞(96孔板)舉例,每孔100 μL染色工作液,染色工作液濃度5 μg/mL計(jì)算,10 mg配置為工作液大概可以用于20000個(gè)孔的染色。
注意事項(xiàng)
1. 使用前請將產(chǎn)品瞬時(shí)離心至管底,再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2. Hoechst染料通常用于染色哺乳動(dòng)物細(xì)胞,但是也可以用來染色死活細(xì)菌,染色死活細(xì)菌時(shí)推薦在PBS或150 mM的NaCl中溶解為終濃度12-15 μg/mL的染色液室溫染色30 min。對酵母的染色較弱。通常對于死細(xì)胞的染色要比活細(xì)胞染色亮度高。
3. Hoechst 33258染料溶于水時(shí)溶解度可達(dá)10 mg/mL,用于細(xì)胞核染色時(shí),推薦的Hoechst 33258工作濃度為0.5-10 μg/mL,客戶可根據(jù)實(shí)際染色情況對染色液濃度及染色時(shí)間上下摸索。
4. 熒光染料都存在淬滅的問題,建議活細(xì)胞或組織染色后立即觀察。
5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
常見問題解答:
◆Hoechst 33258和Hoechst 33342有什么區(qū)別嗎?
對于活細(xì)胞的染色,Hoechst 33342的膜通透性更好一些,對于固定樣品的染色,二者染色效果沒有差異。
◆固定液如何配制?
可以用4%的多聚甲醛進(jìn)行固定。
使用本產(chǎn)品的文獻(xiàn):
參考文獻(xiàn)
1.Hoechst 33258 staining for detecting mycoplasma contamination in cell cultures: a method for reducing fluorescence photobleaching
應(yīng)用方向:檢測細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染
2.A rapid method for accurate DNA measurements in single cells in situ using a simple microfluorimeter and Hoechst 33258 as a quantitative fluorochrome
應(yīng)用方向:對單個(gè)細(xì)胞精確的DNA定量
3.Fluorometric assay of DNA in cartilage explants using Hoechst 33258
應(yīng)用方向:DNA含量測定
4.Use of Merocyanine 540 and Hoechst 33258 for the selective killing of contaminating mycoplasmas in cell cultures
應(yīng)用方向:與Merocyanine 540聯(lián)用,選擇性殺滅支原體
5.Combined use of fluorescent peanut agglutinin lectin and Hoechst 33258 to monitor the acrosomal status and vitality of human spermatozoa
應(yīng)用方向:監(jiān)測人精子頂體狀態(tài)和活力
6.2′‐Deoxyadenosine Induces Apoptosis in Rat Chromaffin Cells
應(yīng)用方向:觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征
7.A novel, sensitive fluorometric staining techniqUE for the detection of DNA in RNA preparations
應(yīng)用方向:瓊脂糖凝膠電泳中DNA的檢測
8.Automated determination of DNA using the fluorochrome Hoechst 33258
應(yīng)用方向:DNA濃度
9.A simple DNA-dependent fluorescence enhancement assay for cell number
應(yīng)用方向:細(xì)胞計(jì)數(shù)
10.Chromosome sorting and DNA seqUEnce localization
應(yīng)用方向:染色體分選
11.Fluorometric Properties of the Bibenzimidazole Derivative Hoechst 33258, a Fluorescent Probe Specific for AT Concentration in Chromosomal DNA
應(yīng)用方向:染色體Q帶的識別
12.12/15-lipoxygenase translocation enhances site-specific actin polymerization in macrophages phagocytosing apoptotic cells
應(yīng)用方向:細(xì)胞核染色